HPIV隶属副黏病毒科（Paramyxoviridae），根据基因组特征及血清学特点，HPIV分为HPIV-1~4血清型，其中HPIV-1和HPIV-3为呼吸道病毒属（Respirovirus），HPIV-2和HPIV-4为腮腺炎病毒属（Rubulavirus）^［4］。HPIV在电镜下多呈球形，直径125~250 nm，基因组约15 500个核苷酸。其基因组可编码6种结构蛋白，如图1所示，包括核蛋白NP蛋白（nucleoprotein，NP）、磷蛋白P蛋白（phosphoprotein，P）、基质蛋白M蛋白（matrix protein，M）、血凝素-神经氨酸酶蛋白HN蛋白（hemagglutinin-neuraminidase protein，HN）、融合蛋白F蛋白（fusion protein，F）和大蛋白L蛋白（large protein，L）^{［5, 6］}。HN蛋白和F蛋白位于HPIV包膜表面，这2种蛋白是中和抗体的主要靶标。M蛋白位于包膜内层，HPIV包膜内为核衣壳，NP蛋白包裹的基因组RNA作为转录的模板，L蛋白和P蛋白形成L-P RNA聚合酶复合体。P基因还编码部分非结构蛋白，这些蛋白在不同血清型间略有不同，HPIV-1 RNA编码C蛋白，HPIV-2和HPIV-4 RNA 编码V蛋白，HPIV-3 RNA编码C蛋白和D蛋白，这些非结构蛋白不是病毒复制的必需蛋白。HPIV感染宿主细胞时与宿主细胞膜融合，释放核衣壳，L-P RNA聚合酶复合体识别模板进行转录，经核糖体翻译为病毒结构蛋白。病毒的子代RNA与NP蛋白组装形成核衣壳，既可参与下一轮转录和翻译，也可与结构蛋白结合形成新的病毒颗粒释放到细胞外^{［7, 8］}。

HPIV主要侵犯呼吸道黏膜的表层组织，在纤毛上皮细胞内复制和繁殖。感染多从鼻和口咽开始，2~5 d后可延伸至下呼吸道并达到复制高峰。HPIV常侵犯<5岁婴幼儿的气管、支气管黏膜上皮细胞，引起细胞变性、坏死增生和黏膜糜烂。当侵犯肺泡上皮细胞及间质细胞时，则引起间质性肺炎，或表现为支气管炎或肺炎^［7］。HPIV-1和HPIV-2更易感染喉及气管上段，与急性喉气管支气管炎有关。而HPIV-3感染远端气道，与支气管炎和肺炎相关。HPIV-4一般感染上呼吸道，通常症状轻。由于婴幼儿免疫系统发育不完善，免疫应答能力相对较弱，抗体持续时间较短，故易发生反复感染。疾病的严重程度取决于HPIV的感染部位、病毒载量、型别及宿主自身免疫等因素。

HPIV感染宿主后刺激机体先天免疫系统，激活多条反应通路，抑制病毒复制。但HPIV的非结构蛋白V蛋白和C蛋白可靶向抑制干扰素（interferon，IFN）系统的信号分子，作为IFN拮抗剂抑制先天免疫应答。不同血清型HPIV抑制先天免疫应答的具体作用机制不同：HPIV-1 C蛋白通过抑制病毒RNA合成，进而抑制先天免疫应答。HPIV-3 C蛋白既可刺激细胞增殖，也可抑制IFN信号传导，促进病毒复制并阻断宿主抗病毒反应。HPIV-3 M蛋白诱导线粒体自噬发生，拮抗干扰素反应，P蛋白进一步阻止自噬体-溶酶体融合，导致自噬体累积，从而最大限度地逃避机体免疫反应并利用自噬体的双层膜结构便于自身复制^［9］。HPIV-2 V蛋白能够与干扰素调节RNA解旋酶结合，抑制IFN诱导通路，目前暂无研究表明HPIV-4可干扰IFN信号传导，因此对宿主先天免疫应答影响较小，其毒力可能因此减弱^{［10, 11］}。

另外，HPIV感染诱导机体形成特异性免疫反应，包括体液免疫和细胞免疫。感染后可产生局部抗体和血清抗体，其中抗HN蛋白和抗F蛋白抗体具有中和、抵御病毒攻击之效，对预防HPIV感染有重要作用。T淋巴细胞反应可清除病毒，HPIV上的HN蛋白、P蛋白和NP蛋白也显示出T细胞结合表位。体液免疫和细胞免疫的共同作用，才能使儿童呼吸道免受HPIV感染^［8，12］，但非终身免疫，因此人体的整个生命周期中可反复出现不同HPIV血清型感染。

儿童HPIV感染后50%以上表现为上呼吸道感染，其中30%~50%并发中耳炎^［27］，因此门诊急性呼吸道感染儿童HPIV检出的比例高于住院儿童，免疫功能受损患者发生严重感染的风险增加。大约15%的儿童HPIV感染累及下呼吸道，HPIV感染在喉炎病例中占60%~75%，在确诊病毒性毛细支气管炎病例中占10%~20%^［8］。HPIV也可引起结膜炎和咽炎^［8］。在有哮喘的患儿中，如果标准治疗效果不佳，HPIV可能引起哮喘的急性发作^［28］。

不同血清型HPIV感染与儿童的某些临床综合征密切相关^［8，29］。HPIV-1是喉炎的主要病因，特征是声音嘶哑、犬吠样咳嗽和喉鸣；HPIV-2也可导致喉炎，但通常比HPIV-1轻；HPIV-3在儿童最常见^{［30, 31］}，容易引起下呼吸道感染，包括毛细支气管炎和肺炎，尤其是在小婴儿中更多见；HPIV-4通常只有轻微的上呼吸道感染症状^［32］，但在小婴儿和有发育障碍、慢性心肺疾病和免疫抑制等基础疾病的儿童中，可导致毛细支气管炎、肺炎和呼吸暂停^{［33, 34, 35］}。

除呼吸道症状表现外，HPIV亦可引起呼吸系统以外的并发症，包括以下几个方面。（1）心肌炎和心包炎：主要表现有疲乏无力、烦躁不安、食欲不振、面色苍白、发热等，年长儿可诉心前区不适、心悸、头晕等，甚至表现为心源性休克、心律失常和猝死^{［36, 37］}。（2）脑膜炎：婴儿可突然发热，并伴有易激惹、喂养困难、呕吐等症状，体检可能发现囟门隆起和颈强直。年龄较大的儿童通常出现发热、头痛、恶心、呕吐、颈强直和畏光^［38］。（3）吉兰-巴雷综合征：典型临床特征是进行性、对称性的肌无力和深腱反射减弱或消失，需注意变异型吉兰-巴雷综合征临床表现不典型^［39］。（4）急性播散性脑脊髓炎：大多数患儿表现为发热、脑膜刺激征和急性脑病，血液和脑脊液有炎症证据，神经系统功能障碍通常在4~7 d进展至高峰，意识水平可从嗜睡至昏迷不等^［40］。

HPIV在免疫缺陷的患者中致残率和病死率较高。肿瘤儿童社区获得性HPIV感染很常见，无论是单独感染还是混合感染，都需要提高警惕，由于其血液学和影像学检查没有特异性，快速诊断和及时处理对于肿瘤患儿的预后至关重要^［41］。HPIV可引起造血干细胞或实质器官移植后的严重感染，造血干细胞移植受者的HPIV肺炎急性期病死率为50%，6个月后达75%^［8］，肾移植或者胰肾联合移植后早期感染 HPIV-3多数症状较轻，但是病毒脱落时间却延长^［42］。HPIV-3在联合免疫缺陷和先天性低丙种球蛋白血症的儿童中可引起腮腺炎；免疫功能低下患者除呼吸道外，在脑脊液、心包液、外周血单个核细胞、心肌和肝脏等样本中也可检测到HPIV^［6］，这些部位的感染较隐匿且容易被低估，导致特殊人群重症及病死率增加。

建议1 患儿出现呼吸道感染症状，且临床怀疑病毒感染时，需进行HPIV筛查。婴幼儿、免疫力低下或缺陷儿童为HPIV感染的高危人群，且HPIV-1、HPIV-3占比较高，出现呼吸道症状时，应重点筛查。HPIV-3易引起下呼吸道感染及重症的情况：如合并心肌炎、脑膜炎及吉兰-巴雷综合征等肺外并发症，应及时进行HPIV-3检测。推荐强度：强推荐。

病毒分离培养是确诊HPIV感染的“金标准”。HPIV培养的常用细胞为原代恒河猴肾细胞和连续猴肾细胞系^［43］，病毒培养阳性一般表现为红细胞吸附实验阳性或观察到细胞变圆或形成合胞体等细胞病变效应，此外还可通过免疫荧光、分子生物学等技术进行鉴定^{［44, 45］}。但该方法耗时较长（5~14 d）、操作复杂且对操作人员专业要求高，因此不作为临床上病毒检测的常规手段。近年来，为满足临床要求，一些改良的细胞培养方法得到应用，如将标本加入到细胞培养板中进行离心，促使标本中的病毒更快地感染细胞，快速培养24~48 h之后结合免疫荧光技术可以在细胞病变效应出现前进行病毒鉴定，有效缩短了检测时间^{［43，45］}。使用水貂肺细胞Mv1Lu和人肺腺癌细胞A549混合而成的R-Mix可以同时对包括HPIV在内的多种常见呼吸道病毒易感，也有效简化了未知呼吸道样本的细胞培养流程^［43］。

建议2 不建议在临床实验室常规开展细胞培养分离病毒，但可有选择地建立该技术平台，以提升实验室的病毒学专业检测能力，从事病毒学研究的专业工作者宜掌握和应用该技术。推荐强度：推荐。

核酸检测方法可以简便、高效地用于HPIV检测，目前已被广泛应用于HPIV流行监测、临床诊断、疗效评估和预后判断^［46］。近年来，随着分子诊断技术的进一步发展，核酸扩增和基因测序等新技术逐渐应用于临床，大大提高了HPIV的检出率。

1.核酸扩增：核酸扩增包括PCR扩增技术和等温扩增技术等。目前最常见的HPIV核酸扩增技术是PCR扩增，如荧光定量PCR、多重PCR等。PCR技术可在2~4 h内从呼吸道样本中鉴定出HPIV的型或亚型，大大提高了检测效率，有助于早期及时确定病原，及时治疗、显著减少患者住院天数、减少抗生素的使用^［47］。需要注意的是，由于PCR阳性结果不能判断是存在失活的病毒片段还是活病毒，仅在患者样本中检测出病毒RNA并不能证明目前的病毒是导致感染的原因，并且呼吸道感染的病因非常复杂，常会有不同病毒或细菌的叠加感染，因此应评估患者样本中是否还存在其他常见呼吸道病原体^［48］。

等温扩增技术包括环介导等温扩增技术和核酸序列依赖性扩增。等温扩增具有可以媲美PCR的高灵敏度和特异度，并且不需要复杂的扩增设备，用时快，成本低^［49］，但其扩增体系的稳定性和方法的成熟度不及传统PCR方法。

此外，还有核酸即时检测（point-of-care testing，POCT）。核酸POCT整合了从细胞裂解、核酸提取扩增到产物分析的所有步骤，降低了检测复杂性。目前HPIV核酸检测已实现了POCT，检测时间缩短至1 h左右，不足之处是灵敏度欠佳^［50］。

2.基因测序：过去10年来，二代测序（next generation sequencing，NGS）技术的发展非常迅速，已广泛应用于临床诊断。NGS技术在感染性疾病诊断中应用主要包括宏基因组二代测序（metagenomic NGS，mNGS）和靶向测序（targeted NGS，tNGS）。mNGS可对样本中多种病原体的全基因序列进行测序，能够更准确地对细菌、真菌、病毒等鉴定到种^［51］，对新型病原的检测、分型、突变鉴定和感染聚类评估方面具有突出优势，在诊断呼吸道感染、医院感染控制、耐药性研究等领域具有广阔的应用前景。但由于mNGS技术检测成本较高，生物信息学数据分析较复杂，对实验室和操作人员的要求高等因素，限制了其在临床的使用。从方法学上看，mNGS虽然可无偏性覆盖多种病原体，但仍存在一些局限，由于RNA容易降解，在检测HPIV等RNA病毒时，敏感度也会下降^［52］。另外，mNGS将来要大规模用于临床常规使用前，还需要解决一些新的问题。如可能出现的潜在的伦理问题、基因组数据的存储和管理、测序结果的正确解释等^［53］。不同于mNGS广覆盖、无偏倚，tNGS通过靶向捕获特定基因后再进行高通量测序，具有病原谱范围明确、测序成本低等优势，检测速度、数据分析以及报告生成更快^［54］。

建议3 核酸检测具备灵敏度高、特异性强的优势，为病毒检测的首选方法，在有核酸检测条件的医疗场所，应优先选择核酸检测，推荐使用多重PCR方法。推荐强度：强推荐。

抗原检测是用标记的病毒特异性抗体来直接检测样本中病毒抗原的方法，根据抗体标记物和检测原理的不同包括直接/间接免疫荧光法、酶联免疫法、免疫层析法等。HPIV抗原检测的适用样本类型为鼻咽拭子、痰液、肺泡灌洗液等呼吸道标本，免疫荧光法对样本中完整细胞的数量要求较高，且必须采集到足量的呼吸道柱状上皮细胞。其余类型的样本要求采集足量，且应尽量在症状出现后一周内采集^［8］。抗原检测具有特异性高、操作简便、快速的优点，但其敏感度较低，易导致假阴性，有时也易与其他病毒发生交叉抗原反应，导致假阳性^［55］。应用针对不同型别的单克隆抗体可以对HPIV的不同型别进行鉴定。

建议4 病毒抗原检测，尤其是免疫层析法的快速检测方法，能在较短时间内向临床出具报告，有一定的应用场景，特别是在流行季节，可作为门急诊、基层医院筛查的方法之一。推荐强度：强推荐。

抗体检测是用HPIV天然或重组抗原与血清或血浆样本中的HPIV特异性抗体反应的原理进行检测。目前HPIV的抗体检测方法有酶联免疫法、间接免疫荧光法、胶体金法、化学发光法、补体结合试验、血凝抑制试验、病毒中和试验等。HN、F和NP蛋白是刺激机体产生血清学抗体反应的主要蛋白，其中抗F和HN蛋白的抗体具有病毒中和活性，HN蛋白抗体可以抑制病毒与红细胞的凝集反应。病毒特异性IgM的检出对病毒感染的早期诊断有一定的价值^［56］，抗体阳转或急性期和恢复期（或间隔10~14 d以上）双份血清特异性IgG抗体有4倍及以上的升高可作为病毒感染诊断的可靠指标之一^［57］。HPIV不同血清型之间存在交叉反应，尤其是HPIV-1和HPIV-3之间，所以通过血清学方法区分HPIV感染的亚型存在一定困难。另外，需注意其他病原体，例如腮腺炎病毒与HPIV的交叉干扰反应可能导致的假阳性。与病原学检测方法比较，血清学抗体检测虽然有一定的窗口期，但由于对实验室设备要求不高，可实现对IgG和IgM抗体的快速检测，因此仍是临床实验室常用的检测方法之一，临床上病原学联合血清学抗体检测的方法可以有效提高HPIV感染检出率^［58］。对免疫功能低下、应用糖皮质激素等免疫抑制剂者及婴儿，病毒感染时常不能产生或延迟产生特异性抗体，可能导致血清学抗体检测呈假阴性，临床检测时需注意这类特殊人群。

建议5 血清学抗体检测有窗口期，与核酸或抗原联合检测可以提高检出率。抗体阳转或急性期和恢复期（或间隔10~14 d以上）双份血清特异性IgG抗体有4倍及以上升高可作为病毒感染诊断的可靠指标之一。推荐强度：推荐。

HPIV临床实验室诊断流程见图2。

实验室检测可为临床提供HPIV感染的重要依据，检测过程的质量控制涉及多个环节，每个环节均关系到检测结果的准确性，应引起重视。一般来说，影响实验室检测结果的因素包括人员、设备设施、样本采集、检测试剂、质控品使用等。实验室应采取合理有效的质量控制手段监控检测工作的全过程，及时发现HPIV检测中出现的问题，通过针对性地采取纠正措施或预防措施，以保证检测结果的准确性。

在实验室检测方法中，针对HPIV的病毒分离培养、抗原及核酸检测，需重点关注检测样本的规范性采集。呼吸道病原体的病原学检测样本包括上呼吸道及下呼吸道样本。常见的用于HPIV病原学检测的样本，包括鼻拭子、鼻咽拭子、口咽拭子、痰液、支气管肺泡灌洗液、呼吸道吸取物等^［8］。HPIV病原检测样本类型的选用，一定程度上需考虑到患儿的免疫状态以及疾病的严重程度和阶段；HPIV感染期间样本采集时间的选择也比较重要^［8］。一般在疾病早期、非重症患儿，主要采集上呼吸道样本，如鼻拭子、鼻咽拭子、口咽拭子等；而重症患儿则优先采集下呼吸道样本如支气管肺泡灌洗液，检测阳性率更高。HPIV作为一种单链RNA病毒，常温条件下极易降解失活。因此，用于HPIV核酸检测的样本，采集后室温下应在30 min内送检，4 ℃环境下可在2~4 h内送检，超过24 h不能送检，应置于-70 ℃~-80 ℃低温保存，并且要避免反复冻融^{［59, 60］}。HPIV血清学检测的样本包括静脉血及末梢血2种类型。血液标本采集后2~8 ℃保存不超过8 h，如果需要保存较长时间，分离血浆或血清后2~8 ℃可保存24 h，确需长期保存应于-80 ℃冰箱内。血液标本应尽可能在感染的急性期和至少间隔2周的恢复期采集双份血清。检测过程中应选择质量稳定可靠的病毒保存液。常用HPIV病原学及血清学检测样本的采集要求如表2所示。血液标本室温运送，其他标本在2~8 ℃下转运；若运送时间超过 24 h，应干冰运输，送抵后应立即进行标本前处理和核酸提取。

建议6 检测样本的选择关系到检测结果的准确性，对于呼吸道病毒感染，鼻咽拭子、鼻拭子及支气管肺泡灌洗液的检出率优于其他标本。针对儿童群体，相较于鼻咽拭子，鼻拭子具备采样安全性高、患者依从性好等优势，推荐采用。推荐强度：强推荐。

建议7 对疑似呼吸道感染的门急诊患儿，应优先选择核酸检测，其中PCR方法应用最为广泛。为便于呼吸道病毒的鉴别诊断，可采用多重PCR方法。当不具备核酸检测条件时，可行抗原、抗体检测，若结果阴性且临床不能排除HPIV感染时，需采用核酸检测方法进一步确认。推荐强度：强推荐。

建议8 对疑似呼吸道感染的住院患儿，建议尽早采用多重PCR检测方法检测病原体，明确病因。若结果阴性且临床不能排除感染时，可进行复检或进一步检查，如mNGS方法。推荐强度：推荐。

儿童HPIV感染具有自限性，多数症状较轻，以对症支持治疗为主。需注意的是，HPIV-3易引起肺炎等下呼吸道感染，在免疫功能低下等高危患儿中，HPIV感染是其致病及死亡的重要原因之一，上述两种情况，均需积极治疗。

1.对症治疗：HPIV-1及HPIV-2感染后易引起急性喉炎，建议予以吸入糖皮质激素，症状明显者全身使用糖皮质激素疗效优于吸入治疗。免疫球蛋白含有中和HPIV的抗体，可能具有一定的抗炎作用^［8］。

2.抗病毒治疗：利巴韦林对于HPIV感染后期，特别是已出现呼吸衰竭的情况下是无效的^［8］，早期治疗是否有效存在争议。目前新的抗病毒药物研究正在进行中，包括唾液酸酶融合蛋白DAS181、HN抑制剂BCX 2798、来源于HPIV F蛋白的C端七肽重复结构域衍生的脂肽VIQKI等。目前DAS181已被批准用于治疗肺移植和受体中造血干细胞移植后的HPIV相关肺炎，二期临床试验提示其对轻度至中度缺氧的严重免疫功能低下患者的HPIV感染有潜在的治疗益处^［63］。

1.疫苗：目前尚无有效的预防HPIV的疫苗。部分针对HPIV-3的疫苗已进入临床试验阶段。早期研究证明全病毒灭活疫苗并不能产生有效的保护作用，而冷适应型HPIV-3减毒活疫苗，嵌合BPIV-3/HPIV-3/RSV-F蛋白减毒活疫苗在Ⅰ期临床试验中显示具有较好的免疫原性和保护作用。

2.感染防控：HPIV可能有较长时间的无症状感染期，给感染防控带来一定困难。故对于免疫低下患儿需加强个人防护措施，如佩戴口罩、保持社交距离、居室保持通风以及注意环境消毒。HPIV具有一定传染性，可引起局部爆发，在医疗场所内，应提高警惕，做到早发现、早隔离、早诊断、早治疗。

建议9 明确HPIV感染后，应及时给予对症治疗，尤其HPIV-3常引起下呼吸道感染，易致重症，临床应提高警惕，重视HPIV-3的筛查，尽早检测、诊断并积极治疗。推荐强度：强推荐。

共识撰写制定组成员（按姓氏拼音排序）：陈大鹏（重庆医科大学附属儿童医院检验医学科），邓继岿（深圳市儿童医院感染科），柯江维（江西省儿童医院检验科），陆权（上海交通大学医学院附属儿童医院呼吸科），刘海鹏［安徽省儿童医院（安徽省儿科医学研究所 安徽省儿童健康与疾病临床医学研究中心）实验中心］，陆小霞（华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院呼吸内科），马丽娟（首都儿科研究所附属儿童医院检验中心），莫丽亚（湖南省儿童医院检验中心），潘秋辉（上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心检验科），尚世强（浙江大学医学院附属儿童医院实验检验中心），吴亦栋（杭州市第九人民医院检验科），向赟（华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院检验部），徐锦（复旦大学附属儿科医院临床检验医学中心），杨俊梅（河南省儿童医院郑州儿童医院检验科），张泓（上海交通大学医学院附属儿童医院检验科），赵锐［山西省儿童医院（山西省妇幼保健院）临床医学检验中心］