供、受者HLA位点的匹配率越高，受者对供者产生的免疫应答越低，因此肝移植术后GVHD的发生率及病情凶险程度也会增高。供者和受者之间HLA完全匹配是肝移植术后发生GVHD的一个重要危险因素^{［9, 10］}。供、受者HLA-B位点而非HLA-A/DR位点的匹配是发生GVHD的重要危险因素^［11］。当3~4个HLA-A和HLA-B位点不匹配时，GVHD的相对风险约为1%，0~1个HLA-A和HLA-B位点不匹配的情况下，该比例增加到7%，同时存在0~1个HLA-DR位点不匹配的情况下，该比例增加到12.5%^［6］。

由于HLA的家族相容性，在活体肝移植（living donor liver transplantation，LDLT）中GVHD的发生率要高于非亲缘性肝移植。当供者是HLA纯合子而受者是HLA杂合子时（即单向供、受者HLA匹配），两者共享单倍型，受者无法识别并清除供者细胞。相反，供者细胞则可以将另一个未共享的单倍型识别为“异己”并对其进行免疫攻击，所以在LDLT中发生GVHD的风险较高^［12］。LDLT后发生致命性GVHD的风险可能取决于供者优势的单向HLA匹配的位点数量，存在所有3个位点（HLA-A、-B和-DR）的错配时GVHD发生率最高^［13］。应排除此类供者，并对供者和受者进行移植前HLA配型检查^［14］。该种情况在成人LDLT中报道病例较多，而在儿童肝移植中鲜有报道。

受者的年龄也是一个危险因素，随着年龄增长，对供者淋巴细胞的免疫反应可能会丧失^{［15, 16, 17］}。年龄>65岁的受者肝移植术后发生GVHD风险增加9倍^［18］。供、受者年龄差较大也是一个危险因素：受者年龄较供者>40岁，术后GVHD风险增加10倍^［4］。而受者年龄比供者年龄大（>20岁）是GVHD的高危因素，同时亦是GVHD后死亡的独立危险因素^{［19, 20］}。

感染巨细胞病毒和单纯疱疹病毒会使受者免疫状态低下，增加肝移植术后GVHD风险^［21］。Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病、各种自身免疫疾病、肝细胞癌所致免疫缺陷状态同样会增加GVHD的风险。此外，酒精性肝病、肝细胞癌合并糖耐量异常，二次移植亦会导致GVHD的高风险^{［22, 23］}。受者术前血清中TNF-α和IL-8浓度异常升高，可能提示术后有发生GVHD的风险^［24］。使用巴利昔单克隆抗体进行免疫抑制诱导亦是致命性GVHD的独立危险因素^{［19, 20］}。通过对受者术前外周血中T细胞（抗原）受体（T cell receptor，TCR）多样性分析，其结果显示：GVHD受者术前外周血中TCR多样性明显降低，表明受者术前免疫状态较差，对抗原的识别能力降低^［24］。肝移植术后再次入院同时合并新型冠状病毒感染的患者，发生GVHD的风险显著升高^［23］。新型冠状病毒感染能够引起强烈的炎症风暴，供者来源的免疫细胞在这种炎症风暴的刺激下可能被激活，诱发GVHD。肝移植术后早期感染新型冠状病毒期间发生GVHD的病例已有报道^［25］。另一方面，新型冠状病毒感染者的免疫力低下，给GVHD的发生创造了有利条件，肝移植术后早期感染新型冠状病毒，当出现GVHD相似的临床症状时，需要警惕发生GVHD的风险。

推荐意见1：供、受者HLA高度匹配，老年受者，酒精性肝病，肝细胞癌合并糖耐量异常，受者年龄大于供者年龄20岁以上是肝移植术后发生GVHD的高危因素。同时受者年龄大于供者年龄20岁以上、使用巴利昔单克隆抗体诱导是GVHD后死亡的高危因素。（弱推荐，证据等级：3b）

研究发现供者既往感染人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒与术后发生GVHD具有极高的相关性^［2］。通过使用TCR测序技术对GVHD患者外周血中移植物抗宿主（graft versus-host，GVH）T细胞在术前供肝中的来源进行检测，结果显示：引起GVHD的GVH T细胞可能是来自供肝中残余的供者外周血T细胞^［24］。所以，供肝获取时，充分灌洗供肝尤为重要。

推荐意见2：供肝获取时应保证充分灌洗，尽可能去除供肝中残余的外周血；供肝修整时尽量清除供者淋巴结。（强推荐，证据等级：5）

不明原因高热是肝移植术后GVHD常见的首发症状，体温为38.5~41.0 ℃，反复多次行细菌学、病毒学及影像学检查，无病原学及支持感染证 据^{［27, 28, 29，31, 32，51, 52, 53, 54, 55, 56］}。

通常先出现在胸部，并逐渐扩散到躯干、颈部和手臂，可波及手掌和脚掌。皮疹最初为黄色斑丘疹，可发展为大疱和脱皮。皮疹可由红斑到紫色斑点组成，并融合成斑块^［6，60］。此皮疹也可能在药物反应、细菌或病毒感染中出现，如中毒性表皮坏死松解和病毒感染，特别是巨细胞病毒感染^［61］，应注意鉴别诊断。

主要表现为腹泻和消化道溃疡^{［62, 63］}。由于淋巴细胞浸润和肠黏膜破坏，导致肠道吸收能力减弱，轻者仅表现为腹胀和轻度腹泻；重者常呈水样腹泻，每日可达10余次或更甚。黏膜溃疡可累及全消化道，引起纳差、恶心、呕吐和腹痛等不适。肠道黏膜糜烂、脱落时可出现便血、腹痛等症状。口腔黏膜损伤的特征是红斑和溃疡，与单纯疱疹病毒引起的口腔黏膜炎症状非常相似，常导致受者吞咽疼痛和困难^［12］。

肝移植术后发生的GVHD患者中骨髓抑制较为常见^{［61，64, 65］}。主要原因是供者来源的淋巴细胞攻击和破坏了受者的造血系统。但需注意鉴别诊断：免疫抑制药物如环孢素A，病毒、细菌和真菌感染有时也会出现全血细胞减少的情况。WBC计数和PLT计数会迅速下降。粒细胞集落刺激因子和促血小板生成素具有一定作用，但一般难以逆转。然而，这些变化也取决于GVHD的发病时间和个别免疫抑制药物不同的血液学效应。

根据文献报道和临床医师经验，单纯以皮疹为主要症状的GVHD临床预后最好，其次是以胃肠道为主的GVHD，而以骨髓抑制为主的GVHD患者通常预后较差，死亡率极高^［27］。

在造血干细胞移植（hematopoietic stem cell trans-plantation，HSCT）中，越来越多的证据表明，GVHD除可累及皮肤、消化道、肝脏，其他器官或组织如中枢神经系统、肺、卵巢、睾丸、胸腺、骨髓、肾脏和骨骼系统也会受到累及，也可能是GVHD的靶器官^［66］。目前，在肝移植后GHVD中已有累及中枢神经系统的案例报道，表现为精神状态改变、局灶性神经功能缺损、认知障碍、癫痫发作，甚至昏迷^{［67, 68］}。累及呼吸系统可以出现急性呼吸困难、低氧血症和间断发作窒息^［48］。以骨痛为首发症状案例也有报道^［54］。

皮肤镜下活检显示真皮-表皮交界处大量淋巴细胞浸润和细胞凋亡。此外，皮肤活组织病理学检查可观察到上皮基底层空泡变性、表皮淋巴细胞浸润和坏死的嗜酸性角质形成。也可出现表皮海绵增生、基底细胞水肿、角质形成、细胞凋亡、淋巴细胞胞外分泌（包括卫星细胞坏死）以及表皮下裂形成^［15］。

根据病理学表现将皮肤损伤程度分为：（1）Ⅰ级为基底层角质形成，细胞空泡形成。（2）Ⅱ级为表皮可见角化不良细胞，基底细胞空泡化明显。（3）Ⅲ级为大量角质细胞坏死，基底层局部形成裂隙。（4）Ⅳ级为表皮全层坏死并与真皮完全分离^［69］。

当出现严重腹泻及便血时可考虑行胃肠道活组织病理学检查，直肠和乙状结肠的敏感性相对较高，内镜下可见黏膜红斑、浅表溃疡及周围渗出液；组织病理学可见隐窝细胞凋亡，部分黏膜出现腺脓肿伴黏膜脱落，淋巴细胞浸润增加。尽管胃肠道活组织病理学检查更具特异性，但该操作有创，因此不建议作为使用IS患者的筛查或一线检查^［5，15］。此外，后续肠道活组织病理学检查在评估治疗效果方面的作用也尚未确定^［70］。GVHD累及胃肠道时，内镜检查表现为非特异性，内镜和组织学评估间存在差异。此外，上消化道受累及比下消化道更常见。由于存在穿孔和出血等风险，肠道活组织病理学检查前应采取预防措施^［71］。

骨髓活组织病理学检查常可见以粒细胞系减少为特征的骨髓抑制征象，后期骨髓象呈现发育不良、各系血细胞减少及再生障碍性贫血的表现^［72］。

推荐意见3：临床怀疑GVHD时，出现靶器官和（或）组织受累时，尽早行相关器官和（或）组织病理学检查，以明确GVHD诊断。（强推荐，证据等级：4）

推荐意见4：皮肤活组织病理学检查目前仍是诊断GVHD的首选方法。（强推荐，证据等级：4）

在具有适当形态学特征的情况下，受累组织内存在供者淋巴细胞浸润可为诊断提供额外证据^{［24，73, 74］}。供者淋巴细胞微嵌合（<1%供者淋巴细胞嵌合）在肝移植受者中比较常见；目前认为微嵌合对免疫耐受和宿主接受移植物很重要^{［75, 76］}。相反，GVHD患者在受者组织（皮肤、胃肠黏膜、外周血）中存在供者淋巴细胞大嵌合（>1%供者淋巴细胞嵌合），范围为1%~80%^{［11，77, 78］}。尽管大嵌合状态与GVHD的发生相关，但仍需要结合临床表现才能确诊GVHD；供者嵌合状态的存在与临床表现和组织病理学有关^［30］。持续存在的大嵌合体有助于GVHD的诊断，但在没有临床症状和组织学证据的情况下，嵌合体的存在是非特异性的，因此嵌合体仅是一种辅助诊断工具^{［15，75］}。

移植术后3个月内出现不明原因发热，如无其他临床表现和体征，排除感染后，应尽快送嵌合体检测，以免延误诊断。如先后出现发热、皮疹等高度怀疑GVHD时，应立即送检嵌合体。

检测受者中供者来源的淋巴细胞最常见的方法是通过血清学或PCR技术进行HLA分型，或通过基因组DNA内高度多态性短串联重复序列（short tandem repeat，STR）的PCR进行分析。HLA分型有助于确认嵌合的淋巴细胞来源于移植肝，而不是输血。利用HLA错配抗体，通过流式细胞学方法连续监测术后外周血中T细胞嵌合比例，结果显示：GVHD发病前1~2周外周血中即可检测到供者T细胞大嵌合状态，并且可以检测到GVH T细胞的克隆扩增^［24］。这种细胞学层面的嵌合体检测方法具有快速简便的优势。应用STR检测受累及组织样本中供者DNA的方法优于细胞水平嵌合体^{［79, 80］}。STR在初始诊断中非常有用，但HLA分型检测更快速。对性别错配的肝移植患者皮肤活组织病理学检查标本，应用荧光原位杂交检测出Y染色体的存在，也可用于GVHD嵌合体的早期诊断^{［58，81］}。

目前嵌合体检测主要方法为STR，时间较长。仅个别医学中心具有STR检测能力，大部分医学中心需将标本送至外部机构检测，检测机构的实验室环境、设备、实验人员的操作方法及送检样本的质量均会影响嵌合体结果，导致不同机构间的STR结果可能存在差异。因此，建议制订STR标准质控流程，提高嵌合体检测的准确率。同时应该积极开发更为简便、易于普及至临床的嵌合体检测方法。

推荐意见5：嵌合体可作为GVHD的辅助诊断。临床怀疑GVHD时，尽早行嵌合体检测，有助于辅助GVHD诊断。常规检测供受者HLA配型的医学中心可使用HLA错配抗体通过流式细胞术对受者外周血中嵌合比例进行初筛，可以一定程度上缩短诊断时间。（强推荐，证据等级：4）

开发辅助诊断肝移植术后GVHD的生物学标志物仍然是目前较为活跃的研究领域。多种炎性细胞因子在GVHD的发生、发展中起重要作用，通过密切监测肝移植术后受者外周血中生物学标志物的水平和变化，可能有助于早期筛选GVHD高危受者。

国内研究结果显示：肝移植术后GVHD受者外周血中检测到IL-2、IL-6、IL-8、IL-18、IFN-γ水平显著升高，在接受GVHD治疗后，IL-2、IL-18和IFN-γ水平下降^{［47，82］}。有研究结果显示：GVHD发病期间受者外周血中供者来源的细胞游离DNA水平显著升高，因此该指标可用于GVHD的快速诊断和治疗反应监测^［83］。

开发GVHD相关生物学标志物，不仅可以筛查GVHD高危患者，还可以辅助早期诊断、早期干预，改善预后，但是需要更多的临床与基础研究佐证。

肝移植术后GVHD的诊断常被延误。因GVHD的体征或症状非特异性，所以GVHD与移植相关并发症（如感染和药物不良反应）的鉴别诊断具有挑战性。由于其罕见性和发病时间的可变性，需要高度警惕才能诊断GVHD。为此，本共识提出以下诊断流程（图1），以便临床医师快速诊断GVHD。

参考HSCT后GVHD^［84］，根据临床症状和体征肝移植术后GVHD可分为4级（表3）。

根据以上分级进一步将肝移植GVHD分为轻型和重型（表4）。

糖皮质激素具有诱导淋巴细胞凋亡和强大抗炎作用，通过控制全身免疫炎症反应，减少靶器官损伤，对改善受者全身症状有效，是治疗肝移植术后GVHD的一线药物^［22］。目前尚无指导激素起始剂量的正式研究，报告的剂量各不相同，部分用药剂量高达每日15 mg/kg。参考HSCT后GVHD的激素方案，结合肝移植术后GVHD临床经验，临床疑似GVHD时，可先行小剂量激素，即每日2 mg/kg，同时，完善活组织病理学检查及嵌合体检测进行确诊；如确诊GVHD，激素500 mg连续冲击治疗3 d，后改为每日2 mg/kg，并在监测治疗反应的同时持续该剂量≥5 d^［22］。在糖皮质激素总剂量不变的情况下，给药频率由每日1次改为每日2次，每周减少0.1 mg/（kg·d），减少至15 mg/d时，更加缓慢减少激素用量，直至停用糖皮质激素。

IVIG能够直接增强受者自身被动免疫力，降低大剂量糖皮质激素治疗带来的感染风险，还能通过抑制淋巴细胞功能、降低网状吞噬细胞活性、抑制补体激活和炎症因子释放等途径稳定、协助恢复受者免疫状态^{［85, 86］}。不仅如此，IVIG对血液系统造血功能的保护及恢复，在肝移植术后GVHD骨髓抑制的治疗中也起到重要作用^［12］。IVIG建议与激素同步使用，用量和持续时间无明确报告，需要进一步明确。

推荐意见6：确诊GVHD时，应立即应用糖皮质激素联合IVIG治疗。（强推荐，证据等级：4）

治疗GVHD时减少还是增加免疫抑制剂存在争议。早期研究认为：增加免疫抑制剂的剂量可以有效抑制T细胞激活，抑制供者T细胞活性。但目前更多研究表明减少或停用免疫抑制剂有助于减轻肝移植术后GVHD的病情并提高生存率。其理论依据主要为GVHD时受者的免疫功能处于极度抑制状态，减少或停用免疫抑制剂可以使受者恢复并提高自身免疫力，以提高自身清除供者来源T细胞的能力，需要注意的是，治疗过程中，如GVHD得到缓解时，免疫抑制剂减量可能会增加发生排斥反应的风险^［87］。此时应逐渐、缓慢增加免疫抑制剂剂量，必要时辅以CD25单克隆抗体，可降低移植肝发生排斥反应的风险。对于何时恢复免疫抑制，目前尚无参考，应综合评估GVHD的临床症状是否被有效控制，嵌合体是否持续下降以及外周血淋巴细胞绝对计数的升高趋势。

推荐意见7：当疑似或确诊GVHD时，免疫抑制剂应减量或停用。（弱推荐，证据等级：4）

肝移植后GVHD的激素反应率高达83%^［63］，但是也存在激素耐药型GVHD（以每天2 mg/kg的剂量开始使用激素治疗3~5 d，GVHD相关临床症状无明显改善或病情进展）^［22］。所以使用激素治疗同时，以下抗体类药物也可尝试用于肝移植术后GVHD治疗。

IL-2在供者来源的T细胞激活与克隆性扩增中起重要作用，抗IL-2受体单克隆抗体（如达利珠单克隆抗体和巴利昔单克隆抗体）可通过与IL-2受体α链上的CD25抗原特异性结合从而抑制IL-2，进而阻断CD4⁺T细胞引发的免疫反应^［89］。既往有肝移植术后GVHD受者使用巴利昔单克隆抗体治疗成功的案例，提示IL-2受体拮抗剂可能是有效的治疗药物^{［90, 91］}。

TNF-α也可能是GVHD的一个治疗靶点，但使用英夫利昔单克隆抗体治疗未获得良好结果，且感染并发症增加^{［92, 93］}。

ATG和阿仑单克隆抗体都能通过作用于T细胞表面抗原和消耗CD4⁺淋巴细胞达到免疫抑制目的^{［94, 95］}。ATG已被证明有助于预防GVHD，但对受者总体生存率的影响有限^［96］。阿仑单克隆抗体是CD52特异性单克隆抗体，在预防和治疗GVHD方面均有益处^［97］。但由于阿仑单克隆抗体免疫抑制更为严重，因此要进行预防性抗病毒治疗，尤其是针对巨细胞病毒和EB病毒。

利妥昔单克隆抗体可通过抑制B细胞生成、减弱B细胞抗原呈递作用及与T细胞相互作用等，达到减轻免疫反应的目的。有研究结果显示：GVHD高危患者应用利妥昔单克隆抗体可使GVHD发生率显著降低，且预后明显改善^［98］。

芦可替尼是一种JAK1/2酶的选择性抑制剂，可有效阻断JAK-STAT信号通路激活，在异基因造血干细胞移植后的GVHD治疗中有效^{［99, 100, 101］}。近年来，有研究结果显示：应用芦可替尼可阻断JAK1/2，调节下游的IL-6和IFN-γ信号通路，可以减轻同种异体T淋巴细胞对移植受者靶器官的攻击，从而改善肝移植术后GVHD患者预后^{［102, 103, 104, 105］}。

抗体类药物和JAK抑制剂的使用大多借鉴于造血干细胞移植后GVHD的治疗，以上药物尽管在肝移植后GVHD的个案报道中均有提及，但仍需要更多的临床循证医学证据验证此类药物在肝移植术后GVHD治疗中的效果和安全性。

其他治疗方法包括血浆置换、单倍体相合HSCT、脐带血移植、HLA相同的异基因外周血造血祖细胞移植、体外活化同种异体反应性宿主T细胞的过继转移、抗供者HLA抗体和间充质细胞治疗^{［16，106, 107, 108, 109, 110, 111］}。

一旦GVHD累及骨髓，导致受者出现严重的类似于再生障碍性贫血的骨髓衰竭，伴有极高的病死率。已有HSCT成功治疗肝移植术后GVHD的案例报道^［112］。评估肝移植受者是否适合接受HSCT时，应考虑GVHD发生时的合并症，同时与HSCT专家进行多学科会诊。在寻找异基因HSCT供者时，需考虑肝移植受者的HLA配型，而不是器官供者的HLA配型。目前关于肝移植行HSCT的报道较少，但供者、受者和造血干细胞供者间HLA错配程度对GVHD和排斥反应的发生无明显影响。

间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是一类具有自我更新及向间叶细胞起源的各种细胞系分化潜能的非造血系干细胞。MSCs所具有的低免疫原性和免疫调节特性，为其作为临床治疗免疫相关性疾病提供可能。目前，MSCs在造血干细胞移植后GVHD的治疗上显示出良好的疗效^［113］。国内已有学者使用输注体外培养扩增的MSCs尝试治疗肝移植术后GVHD，并取得成功^［52］。目前使用MSCs治疗肝移植术后GVHD的报道较少，仍需更多的临床循证医学证据验证该方法的疗效和安全性。

近年来，中医药治疗在HSCT相关GVHD的治疗中取得疗效^{［114, 115］}。国内学者早在2011年报道使用高丽红参治疗肝移植术后GVHD的成功案例^［116］。高丽红参具有提高免疫力、免疫调节、抗氧化、抗疲劳、抗辐射、抗肿瘤和调整人体内分泌系统的功能。临床上可以尝试使用中医药治疗肝移植术后GVHD，为中医药治疗肝移植术后GVHD提供参考。

当出现骨髓抑制时，应立即停用骨髓抑制性的药物，同时应用粒细胞集落刺激因子、促PLT生成素及成分输血对症支持治疗。应用质子泵抑制剂抑制胃酸、保护胃黏膜；保证充分的肠内营养对维持和保护消化道功能十分必要，若患者正常进食受影响，则辅以部分或完全胃肠外营养支持。此外，应对出现的其他并发症采取及时、积极的对症支持治疗。

与重型GVHD比较，轻型GVHD的治疗较为可控，治疗轻型GVHD时，免疫抑制剂适当减停，糖皮质激素应适当减量，预防性应用抗菌药物，对症支持治疗。轻型GVHD可以进展为重型GVHD，需要及时评估GVHD的进展，及时更改治疗方案。肝移植术后重型GVHD的治疗流程见图2。